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一、心肌缺血实验模型：

        以手术方式短暂结扎冠脉的左前降支。其中结扎阶段属于缺血过程，而解除结扎后属于再灌注过程。该模 型根据实验需求可延长再灌注足够长的时间。这一模型造成的是局灶性的心肌IRI，比较符合机体IRI的病 理过程，但是实验结果受手术和机体内环境的影响较大。

实验动物： C57BL/6J小鼠 ，雄性

体重：22g±2g

周龄：8周

动物等级：SPF级

手术方法： 

       动物深度麻醉，确认麻醉状态后，备皮，安装好心电监护仪，消毒局部皮肤，铺洞巾后剪开肋间皮肤， 钝性分离肌肉、打开心包膜，将心脏推出体外，暴露左冠状动脉前降支，用6-0无菌丝线快速结扎，打活 结，看到心脏底部变白，用荷包缝法迅速关闭胸腔，挤压防止气胸，造成左室前壁心肌缺血。分别记录术 前、缺血时心电图变化。

到达缺血时间以后，打开胸腔，解开活结，再次关闭胸腔，缝合肌肉皮肤，进行心肺复苏。分别记录术 前、缺血时和再灌注后的心电图变化。造模成功后进行药物治疗，术后观察动物活动、采食情况。处死前 对实验动物采血。术后进行心肌组织取样、TTC-Evans blue染色，进行心梗面积计算。

手术后护理及观察：

1、术后护理：术后单笼饲养，常规饲料及饮水。

2、观察：每天观察动物死亡或濒死情况、精神状态、行为活动、进食等。 

3、伤口局部观察：术后每天1次，观察伤口有无红肿发炎等。 

4、体重称量记录：术后体重称量记录：术后2次/周，称重并记录体重变化情况。 

二、脑缺血动物模型 脑缺血在临床上具有较高的发病率和死亡率，严重危害中老年患者健康，寻找有明确疗效且作用机制清晰 的预防和治疗脑梗死的药物是当前研究的前沿课题和热点领域。因此，脑缺血动物模型的制备在科学研究 中具有重要意义。 

剪开颈部皮肤，钝性分离颈部肌肉，暴露并游离单侧颈动脉，穿线备用。 

动脉夹暂时夹闭主动脉，并结扎颈外动脉。主动脉用注射器针头挑开小口，插入自制线栓到颈内动 脉，大约 2.5-3cm。结扎颈内动脉，结扎主动脉近心端，松开动脉夹。 

逐层缝合，根据实验的需要的缺血时间进行拔栓手术（再灌注），拔栓时动物要完全麻醉，把出线栓 的长度约为 0.5cm。 模型成功的评判方法 神经功能缺损（NDS）评分 0 分：活动基本正常，无明显神经病学症状； 

1 分：左侧前爪无法完全伸展； 

2 分：爬行时向左侧转圈； 

3 分：行走时向偏瘫侧倾倒； 

4 分：不能自动行走，有意识障碍 

5 分：死亡 

水迷宫实验 Morris 水迷宫（Morris water maze, MWM）实验是一种强迫实验动物（大鼠、小鼠）游泳，学习寻找 隐藏在水中平台的一种实验，主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感（空间定位）的学习记忆能力。 

TTC 染色 TTC 染色是常用来评价脑缺血损伤的指标，缺血区域会呈白色。

HE 染色 一般发生缺血损伤的脑组织的神经元细胞会受到明显损伤（上侧正常，下侧损伤） 

TUNEL 染色 发生损伤的脑组织，TUNEL 染色的细胞会明显增多。