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尼氏染色

实验技术简介:

Franna Nissl (1860-1919) 1892年创立了Nissl染色法,以发现Nissl小体和Nissl变性而闻名。常用的碱性染 料有Cresyl violet (焦油紫,甲.酚紫,克紫);thionine (硫荲);tolridine blue (甲苯.胺蓝)等。 尼氏体为嗜碱性物质,又称嗜染质,光镜 下呈斑块状或细粒状散在均匀分布。在一些大型的运动神经元, 尼氏体大而多,宛如虎皮花纹,又称“虎斑”。电镜下,尼氏体由大量平行排列的粗面内质网和其间 的游离 核糖体组成。尼氏体是神经元胞体细胞质的特征性结构之一,神经元胞质另外一特征性结构为神经原纤维。 

技术原理:

正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏体,它们主要分布于神经细胞 的浆中,形状有大有小,如三角形, 有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色,这些染料如焦油坚牢紫(Cresyl fast violet)亚 甲蓝(methylene blue)甲苯.胺蓝(toluidine blue)硫董(thionin)等钭其染为蓝色。但是,当神经细胞 受伤后,胞质内 的尼氏体更可发生变化,严重的可消失。 

实验操作流程:

1、切片脱蜡至水

2、用焦油坚牢紫水溶液浸染20-30分钟

3、水洗 

4、用95%酒精分化 

5、无.水.酒.精脱水,二甲苯透明,中性树胶 

实验结果:

神经细胞单位:

紫-蓝色 细胞核:紫-蓝色 尼氏体:紫-深蓝色

结果展示

神经元尼氏(nissl)染色 


客户提供: 

1、组织样品:新鲜组织放入液氮或-80度保存,组织不少于100mg; 

2、培养细胞:通过细胞计数取不少于2×106个细胞于EP管,加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,混匀后保 存于冰箱(-80℃,避免反复冻融); 

3、血液细胞标本:以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂, 保存(-80℃可长期保存,避免反复冻融);

4、血清或细胞培养液标本:离心去掉杂质后取上清入EP管,保存(4℃可保存15-20天,-80℃可长期保 存,避免反复冻融); 

5、石蜡切片,冰冻切片以及细胞爬片,涂片等。 

6、样本运输:可选择以下任何一种方式寄送标本 组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后,加冰袋寄送; 细胞样本也可直接寄送培养瓶(密封保证不污染、培养液不漏出); 血清或上清液直接加冰袋寄送(送视路程远近2-3天可到达)。 

交付标准: 

1、图片; 

2、完整项目报告(材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果)。 

其他: 

应用酒精分化切片,要迅速,防止过度分化,将切片上的颜色全部脱掉



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