同位素标记定量:
iTRAQ(isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation)&TMT(Tandem Mass Tags)分别由AB Sciex公司和 Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术,利用多种同位素试剂标记蛋白多肽N末端或者赖氨酸侧链基团,不同分子量的试 剂对不同来源的样品进行标记从而实现不同样品间蛋白质组的比较。
iTRAQ实验步骤:
1.样品准备:将待测样品进行定量计算出样品蛋白浓度;
2.蛋白还原烷基化及酶解:每组样品各取100μg按照iTRAQ试剂盒要求进行处理,使用测序级胰蛋白酶溶液酶解后,超滤管 离心收集酶解肽段;
3.iTRAQ标记:将iTRAQ试剂平衡到室温,用150μL异.丙.醇溶解,取酶解肽段加入iTRAQ试剂后室温反应2 h,加入水终止 反应,等量混合不同组样品,真空冷冻干燥样品;
4.LC-MS-MS分析:使用Thermo的Q-Exactive Orbitrap进行串联质谱鉴定。
5. 数据处理及生信分析
结果展示:
实验周期及交付标准
1.实验周期:4-6周
2.交付标准:蛋白定量结果、鉴定结果、质谱原始数据、生信分析结果(GO分析、KEGG分析等等)
需确认的信息
1.样本的种属
2.样本的类型(组织or细胞or血液)
3.样本的数量及分组
4. 分析要求
收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
更多实验技术服务请浏览网站其他内容,或来电咨询!
做实验,找硕玺!您的科研生涯,我们一路相伴!
【平台项目开展范围】慢病毒,腺病毒,RNAi类,分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动 物实验,蛋白组学实验,芯片类实验,并为广大客户朋友们提供课题设计指导、基金申请指导、SCI、核 心期刊等服务。
【硕玺生物】已开展了数千个实验外包项目。我们专注于医学课题研究,已从课题申请、方案设计、试剂 采购、模型构造、标本检测、数据分析、以及对SCI撰写与发表的支持,各个环节积累了数千个成功案例 经验,为数千个来自临床的科研工作者解决了大量的科研问题。更多相关实验服务信息请咨询硕玺生物。