急性肺损伤模型 / 呼吸系统模型

目的： 

小鼠LPS诱导复制急性肺损伤模型，观察研究药物对小鼠急性肺损伤模型的保护作用及机制。 

方法： 

1、小鼠腹腔注射麻醉, 麻醉深度为中度 (昏迷但掐尾有反应)； 

2、根据小鼠体重按10mg/kg的剂量, 计算10mg/mL浓度的LPS的给药体积 (总体积控制在30～50μL最 佳) ； 

3、移液器精确吸取所需滴注液体的体积, 右手拉住小鼠尾巴, 左手拇指和食指抓住小鼠耳朵, 控制住小 鼠的头部, 轻轻推移液器, 枪头可见吸取的小液滴 (约2μL/滴) , 轻轻靠向小鼠右鼻孔, 左手立刻快速有力度的 向上提30～40cm, 再缓慢轻轻回到左手起始位置 (小鼠始终保持鼻孔朝上) , 进行来回10次； 

4、然后同样的操作向小鼠左鼻孔滴加小液滴, 左右鼻孔依次滴加, 直至液体滴注完成, 最后松开小鼠, 将小鼠利用胶带固定于鼠板, 腹部朝上、头部朝上倾斜的体位保持30min以上, 待小鼠复苏, 放回鼠笼饲养观察。

对照组A和实验组B小鼠肺组织病理图(HE染色，×100) 

模型评价： 

1.肺损伤后的大体观察： 

肺损伤后有肉眼可见肺部大面积出血渗出，可以直观的反映肺损伤程度。

2.肺的湿/干重比： 

肺的湿/干重比是反应肺水肿的直接指标，也是反应肺损伤严重程度的敏感指标。建模后，大量液体渗出至肺泡和肺间质， 导致肺的重量增大，而肺的干重则不受影响。处死大鼠、剪断气管后取全肺，称湿重，然后将肺置于65℃恒温箱中干燥， 24h 后取出称干重，计算肺湿/干重比值。 

组织病理学： 

取左肺4%多聚Jia醛固定，然后将肺组织常规脱水，石蜡包埋，切片（厚度为5μm），HE染色。HE染色肺组织学评价可以 直观的反应肺损伤的程度，ALI组织病理学主要表现为肺泡中性粒细胞及红细胞的渗出，肺泡壁透明膜的形成。HE染色后可 在低倍镜下观察到整个左肺组织的炎症细胞浸润、水肿以及损伤，评估肺部损伤分布情况；而高倍镜下则可以对肺泡结构进 行辨认，对肺损伤程度进行评估和评分。

评分方法：取6个视野进行出血及水肿评分。 

0分：没有损伤 

1分：<25%的损伤面积 

2分：25%~50%的损伤面积 

3分：50%~75%的损伤面积 

4分：>75%的损伤面积