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肾盂肾炎动物模型 泌尿系统模型

慢性肾盂肾炎动物模型 

实验方法 

       利用倾斜平板法制备100000000/ml及1000000/ml两种浓度大肠埃希菌(O111B4)菌液待用,使用前测集落形成单位(CFU)值 核实浓度。体重200g左右雄性大鼠,术前常规禁水24h,先用细线扎住大鼠阴茎。在乙mi吸入麻醉下,动物仰卧固定于手术 板上,常规消毒腹部皮肤并去毛,沿下腹部正中切开,充分暴露左侧输尿管及膀胱,在输尿管中段用10号半圆针、0号黑线 向侧腹部穿针,暂不结扎。用注射器向膀胱内注射100000000/ml浓度的菌液,每只注射量约0.5ml左右,常规手术关闭腹 腔。以适度松紧结扎侧腹部黑线(24h后解除),松开扎住阴茎的细线,术后恢复正常饮水与进食。分别于实验预定时间作肾 功能及血生化指标测定;同时麻醉处死动物,取两侧肾脏,一半组织经固定液固定,作常规组织切片,光镜下病理检查;另 一半组织匀浆后作细菌培养。处死动物前膀胱穿刺抽取尿液作细菌培养。 



模型特点 

       模型动物术后90d时,均表现为尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)/尿肌酐明显升高;模型制作过程中,24h尿蛋白定量无 明显增加。血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)分别于30、60、90d检测无明显升高。术后第7日时,模型动物膀胱尿标本及左肾组 织细菌培养为阳性,麦康凯培养基上为不透明红色圆形菌落,血平板上则为稍凸、中等大小、边缘整齐、不透明灰白色圆形 菌落;镜下为革兰氏染色阴性的粗短杆菌。细菌培养高阳性率可持续保持到术后第60日。肉眼观察第7日时模型动物左侧肾 脏明显肿大,其表面可见粟粒样脓肿,部分已融合成片;肾纵切面有脓肿形成;第15日时肾纵切面可见较多脓液,肾孟明显 扩张;第30日时肾脏肿胀部分减轻,外观仍见脓肿;第60日肾脏体积肿大减轻;第90日时左肾可见明显皮质瘢痕形成,表 面凹凸不平,体积缩小。肉眼观察未见右。肾有化脓灶或瘢痕形成,但可见右肾代偿性增大。镜下病理学观察显示,病变急 性期左肾肾盂黏膜上皮细胞坏死、脱落,腔内积脓,肾实质弥漫性化脓灶,小管腔内可见白细胞管型;7~15d时淋巴细胞 浸润明显;30d可见间质纤维组织增生,肾盂处瘢痕形成;60d时部分肾小球出现纤维化;90d时可见间质纤维化,并有灶性淋巴细胞浸润。 



急性肾盂肾炎动物模型 


单纯感染模型 

实验方法 

       体重为200g左右大鼠,禁止饮水24h后,事先用细线扎住大鼠阴茎。在乙mi吸入麻醉下,动物仰卧固定手术板上,常规消毒 腹部皮肤并去毛,沿动物下腹部作正中剪开,充分暴露膀胱,用注射器直接向膀胱内一次性注射浓度为1000000/ml的大肠 埃希菌(O111B4)菌液,每只注射量约0.5ml,手术缝合切口,关闭腹腔。1h后松开扎阴茎细线。术后恢复动物正常饮水与进 食。分别于预定时间处死动物,取其两侧肾脏,小心去除肾包膜;然后纵向切开肾脏,一半匀浆后行细菌培养,另一半置于 固定液中固定,作常规组织切片,HE染色,光镜下观察。同期膀胱穿刺作尿液细菌培养。 


模型特点 

       术后3d尿液能培养出细菌,于麦康凯培养基上生长出红色圆形菌落;至7d时仍有80%的动物细菌培养阳性,15d时则仅有少 数动物细菌培养阳性。肾组织细菌培养大部分动物双肾细菌培养为阳性,部分动物为一侧肾脏培养阳性。至第15日时,仍有 少数肾脏细菌培养阳性。大体标本肉眼观察可见模型动物双肾体积均有不同程度增大,肾表面无明显脓肿;其纵切面可见肾 盂扩张,黏膜充血,肾皮质、髓质分界不清。镜下病理学观察显示,3d时肾盂黏膜下及间质区以中性粒细胞为主伴有少量淋 巴细胞的炎症细胞浸润,毛细血管扩张、充血,间质水肿。第7日时肾盂黏膜下及间质内可见淋巴细胞灶性浸润,并可见少 量嗜酸性粒细胞,间质毛细血管扩张;至15d时仍可见间质淋巴细胞浸润,毛细血管增生、扩张,并有少量纤维母细胞、肉 芽组织形成。 




手术+感染模型 


实验方法 


      大肠埃希菌(O111B4)菌液的制备:将菌种接种于肉汤培养基,37℃、5%CO2孵箱内孵育12h,利用倾斜平板法制备 1000000/ml浓度菌液待用。体重为200g左右雄性大鼠,禁止饮水18h后经腹腔按30mg/kg体重剂量注射戊巴bi妥钠麻醉。动 物仰卧固定手术板上,常规消毒腹部皮肤并去毛,铺无菌手术巾。沿下腹部作长约2cm正中切口,逐层切开腹壁进入腹腔, 充分暴露左侧输尿管及膀胱;用4号缝合丝线从中段输尿管两旁分别向侧腹部穿针并引出缝合线,两针尽量保持相近,暂不 结扎,用动脉夹夹闭阴茎,用 TB针向膀胱内缓慢注入0.75ml菌液。然后拉紧腹壁外面的缝合线两端,以适当松紧度“结扎” 输尿管。逐层缝合腹壁切口,松开阴茎动脉夹,术后动物恢复常规饲养,自由饮水和进食。手术后20h,拆去腹壁外面输尿 管结扎线,使输尿管重新开放。分别在规定的时间用动脉夹夹住大鼠阴茎后,用乙mi麻醉,仰卧于手术台上,无菌条件下开 胸、开腹,抽出心血和尿液,切取左右肾脏和脾脏,作肉眼检查、细菌培养及病理组织学检查。 


模型特点 

       术后第3日模型动物膀胱尿液即能培养出细菌,于麦康凯培养基上生长出红色圆形菌落。第7日时细菌培养阳性率分别可高达 80%以上,这种高阳性率可持续保持15d以上。结扎一侧肾脏肾组织细菌培养也有细菌生长,未结扎一侧肾脏细菌培养阳性 少见,且持续时间较短。心血和脾脏细菌培养均为阴性。肉眼观察模型动物左肾体积较右肾有不同程度增大,左肾表面可见 数量不等的微小脓肿,个别肾脏有突出肾表面的较大脓肿;切面肾盂扩大,黏膜充血、肿胀,肾盂内有脓性分泌物,有的肾 切面可见微小脓肿或锥形炎症灶。右肾外观和切面未见明显异常。镜下病理观察显示,术后3d模型动物左肾肾盂肾盏黏膜充 血肿胀,有的可见黏膜表面有局灶性脓性分泌物,黏膜下可见大量中性粒细胞浸润。肾间质血管充血,多数肾脏可见脓肿, 在一些肾乳头部尚可见大小不一的锥形炎症灶;肾小管不同程度扩张,以远曲小管为重;小管周围有较多中性粒细胞浸润, 部分肾小管上皮细胞坏死、脱落,管腔内可见脓细胞及少量管型。肾小球无明显损伤。术后7d动物左肾间质炎症细胞减少, 肾盂黏膜下、肾小管周围可见以中性粒细胞为主,伴有较多淋巴细胞和单核细胞的炎症细胞浸润;脓肿灶边缘出现较多成纤 维细胞,灶内除有中性粒白细胞外,尚有大量淋巴细胞、单核细胞。肾盂黏膜充血肿胀减轻,黏膜下中性粒细胞细胞浸润明 显减少,出现较多单核细胞、淋巴细胞。右肾组织无明显组织形态学改变。 

需确认的信息 

1. 模型种属(大鼠还是小鼠或是其他种属)

2. 动物体重有无要求,年龄有无要求

3. 雌雄有无要求

4. 模型构建具体方案

5. 取材要求(采血、取组织样本)


收费标准/服务周期/提供结果: 

欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。 

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